Ei ollut niin kauan sitten, että geenitekniikka oli tieteiskirjallisuutta - sai yhden organismin kasvamaan toisen ominaisuuksilla. 1970-luvulta lähtien geneettiset manipulaatiotekniikat ovat kuitenkin edenneet pisteeseen, jossa vieraan DNA: n silmukointi organismiin on melkein rutiinia. Esimerkiksi tuholaisten vastustuskyvyn geenit voidaan silmukoida maissiin, ihmisen insuliinin valmistusgeenit voidaan laittaa bakteereihin ja geenit ihmisen syöpien jäljittelemiseksi voidaan laittaa laboratoriohiiriin. Menetelmän yksityiskohdat ovat liian monimutkaisia kuvaamaan lyhyessä artikkelissa, jossa on monia vaihtoehtoja kussakin vaiheessa, mutta vaiheiden loogisen jakson käsitteellinen ääriviiva on melko suoraviivainen.
Inkuboi plasmidi-DNA ja mielenkiinnon kohteena oleva DNA restriktioentsyymin kanssa. Restriktioentsyymi havaitsee spesifisen sekvenssin DNA-emäksiä ja leikkaa DNA: n toisistaan siinä kohdassa. Restriktioentsyymit johdetaan jokaisesta bakteerien puolustusmekanismista virusta vastaan. Ne ovat molekyylejä, jotka snip DNA: ta, kun ne havaitsevat tietyn emäskuvion.
Inkuboi leikattu plasmidi ja genomiset DNA-fragmentit DNA-ligaasilla. Suurimmalla osalla restriktioentsyymeillä pyöreällä plasmidilla ja genomisilla DNA-fragmenteilla on komplementaarisia "tahmeita päitä", jotka tarttuvat toisiinsa. DNA-ligaasi lopettaa sitten kappaleiden liimaamisen. Tuloksena on joukko pyöreitä plasmideja, jotka sisältävät osia genomisesta DNA: sta.
Aseta plasmidit bakteereihin ja viljele bakteereja modifioidulla DNA: lla kyllästettyjen organismien pesäkkeiden kasvattamiseksi. Jos plasmidissasi on antibioottiresistentti geeni, josta isäntäbakteerista puuttuu, voit seuloa menestyksekkäästi muunnetut bakteerit viljelemällä bakteereja antibiootti-infusoidulla kasvualustalla. Plasmidien insertoimiseksi bakteereihin on useita menetelmiä, kuten mikroneulan käyttäminen, sähkökentän käyttäminen pienten reikien avaamiseksi bakteerikalvoon tai pelkästään bakteerien ja plasmidien yhdistäminen samaan ratkaisuun ja antaminen bakteerien absorboida ne luonnollisesti.
Näyte solut muunnettujen bakteerien eri pesäkkeistä. Pestään näytteiset solut pesuaineliuoksella bakteerikalvojen hajottamiseksi ja DNA: n uuttamiseksi, sitten kuumennetaan se tai altistetaan natriumhydroksidille säikeiden erottamiseksi. Tämä altistaa DNA: n emässekvenssin analyysille.
Inkuboi DNA fluoresoivalla koettimella. Loista ultraviolettivalo inkuboidulle DNA: lle ja tarkkaile fluoresenssia. Koetin koostuu lyhyestä DNA-sekvenssistä, joka vastaa lisättämääsi genomista DNA: ta. Jos koetin vastaa etsimääsi DNA: ta, se hehkuu valaistuna.
Eristä bakteerit pesäkkeistä, jotka sisältävät lisättävän geenin. Kopioi DNA joko antamalla bakteeripesäkkeiden kasvaa, tai ota DNA kuten aikaisemmin ja kopioi se polymeraasiketjureaktiokoneessa.