Sisältö
- TL; DR (liian pitkä; ei lukenut)
- Retentiokertoimet
- Ohutkerroskromatografialevy
- Liuottimen vaikutusten pidätystekijät
- Muut tekijät
Ohutkerroskromatografian aikana teknikko sijoittaa kemiallisen seoksen täplät tasaiselle levylle, joka on päällystetty imukykyisellä materiaalikerroksella, ja sijoittaa sitten levyn alaosan liuottimeen. Kun liuotin liikkuu levyä ylöspäin, seoksessa olevat kemikaalit liikkuvat sen kanssa eri nopeudella, joten ne erottuvat. Tämä testi määrittää, mitkä kemikaalit ovat seoksessa, vertaamalla tuntemattomien matkustusnopeuksia tunnettuihin normeihin. Tuloksiin voivat kuitenkin vaikuttaa monet tekijät.
TL; DR (liian pitkä; ei lukenut)
Retentiokerroin arvoihin ohutkerroskromatografiassa vaikuttavat absorboiva aine, liuotin, itse kromatografialevy, levitysmenetelmä ja liuottimen ja levyn lämpötila.
Retentiokertoimet
Kemikaalin retentiokerroin ohutkerroskromatografian aikana on mitta siitä, kuinka pitkälle se siirtyy levyä ylöspäin vasteena liuottimen liikkeelle. Koska kemikaalin absoluuttinen liike riippuu siitä, kuinka pitkälle liuotin kulkee, lasket retentiokertoimen arvot suhteessa liuottimen liikkumisasteeseen. Kemikaalin retentiokerroin on kemikaalin siirtämä pystysuuntainen etäisyys siitä kohdasta, josta se alun perin levitettiin, jaettuna liuottimen kuljettamalla etäisyydellä - mitattuna samasta lähtöpisteestä.
Ohutkerroskromatografialevy
Itse ohutkerroskromatografialevy voi vaikuttaa tietylle kemikaalille saatujen retentiokertoimen arvoon. Ohutkerroskromatografialevyt voidaan päällystää monilla erilaisilla imukykyisillä aineilla; useimmiten piidioksidi tai alumiinioksidi. Koska retentiokerroin perustuu kemikaalin suhteelliseen affiniteettiin imukykyiseen aineeseen verrattuna liuottimeen, absorboijan vaihtaminen voi muuttaa suuresti retentiokerrointa. Myös absorboivan kerroksen paksuus ja tasaisuus voivat vaihdella levystä toiseen, varsinkin jos ne ovat käsintehtyjä. Nämä tekijät voivat myös muuttaa kemikaalien retentiokertoimen arvoa.
Liuottimen vaikutusten pidätystekijät
Koska liuotin kantaa kemikaalin levyn yläpuolelle, käytetyllä erityisellä liuottimella on myös merkittävä vaikutus kemikaalin retentiokerroin arvoon. Liuotin, jolla on vahvempi vuorovaikutus tietylle kemikaalille, helpottaa helpommin kemikaalin affiniteettia imukykyiseen kerrokseen ja siirtää kemikaalia kauemmas tietyn ajanjakson aikana. Liuottimien seoksilla voi olla myös erilaisia vaikutuksia kunkin liuottimen osuudesta riippuen.
Muut tekijät
On olemassa muutamia muita tekijöitä, jotka voivat vaikuttaa retentiokertoimeen joissakin tapauksissa. Liuottimen ja levyn lämpötila voi tehdä pieniä muutoksia, koska esimerkiksi liuotin voi usein paremmin liuottaa kuljetettavia kemikaaleja korkeammissa lämpötiloissa. Teknikon tekniikka näytteen levittämisessä levylle voi myös muuttaa retentiokerrointa. Liian suuren näytteen käyttäminen voi johtaa suuriin, diffuusiokemikaaleihin, jotka liikkuvat levyllä ylös, mikä vaikeuttaa kemikaalin kuljetusetäisyyden tarkkaa mittaamista.