Sisältö
Tutkijat ja tutkijat tutkivat bakteerikasvua valmistamalla viljelmiä laboratoriossa. Ravinteita sisältävää agaria sisältävät Petrimaljat kasvattavat bakteeriviljelmiä yhdellä pyyhkäisyllä tai ymppäyksellä. Opiskelijat voivat valmistaa ravinne-agarin kotona hyödyntämällä päivittäistavara- tai terveysruokakaupoista tiedemessuhanketta. Perinteiset keittiökoneet ja perustason keittiövälineet tarjoavat välineet steriilin viljelyalustan valmistamiseksi, joka voidaan jakaa petrimaljoihin. Steriilien tekniikoiden noudattaminen kuumentamalla materiaaleja ja pitämällä pinnat puhtaina ja kuivina parantavat tuloksia estämällä homeita ja hiukkasia saastumasta viljelmää.
Aseta kahvisuodatin suodattimeen ja ripusta suodatin kirkkaan kulhon aukon päälle.
Kaada liemi hitaasti suodattimeen ja varmista, että liemi ei vuoda suodattimen sivuilta. Jos suodattimeen tukkeutuu hiukkasia, poista käytetty suodatin, korvata se puhtaalla suodattimella ja jatka liemi kaatamista.
Poista siivilä ja suodata kulhon yläosasta ja tarkkaile, näyttääkö liemi kirkasta (ts. Nesteessä ei ole suspendoituneita hiukkasia). Jos hiukkaset kelluvat nesteessä, toista vaiheet 1 ja 2 käyttämällä toista kirkasta kulhoa ja tuoretta kahvisuodatinta.
Aseta potti liesiin ja kaada kirkas liemi pottiin.
Lisää 16 unssia tislattua vettä astiaan, joka sisältää liemen.
Kytke liesi päälle ja säädä lämpötila keski-alhaiseen. Kuumenna liemi kiehuvaan (ts. Pieniä kuplia ilmestyy lähelle potin sivua).
Lisää 1 tl agar-agar-jauhetta hauduttavaan liemeen (noin 2,5 grammaa) ja sekoita seosta, kunnes jauhe on liuennut. Sekoita jauhe liuottamisen estämiseksi ja estä liivateen uppoutumisen astian pohjaan (missä se voi palaa).
Toista vaihe 7, kunnes kaikki agar-agarjauhe on liuennut liemessä.
Jatka liemen sekoittamista noin minuutin ajan varmistaaksesi, että kaikki jauhe on täysin liuennut.
Sammuta liesi, aseta kansi kattilaan ja anna nesteen jäähtyä vähintään 15 minuutin ajan.
Järjestä steriilit Petri-astiat peräkkäin helpon asentamisen helpottamiseksi, mutta älä poista kannet. Halutessasi aseta kangas lämpimän astian pitämiseksi. Jos käytät päällystettyjä vaniljakastikekuppeja petrimaljojen sijasta, steriloi vaniljakastikekupit asettamalla kupit ja kannet ylösalaisin (ylösalaisin) foliossa peitetylle evälevylle ja paista uunissa vähintään tunnin ajan 375 astetta Fahrenheit. Varmista, että steriloidut kupit ja kannet jäähdytetään kokonaan ennen käyttöä.
Kosketa varovasti potin ulkopintaa varmistaaksesi, että se on lämmin kosketusta varten, ja aseta potti kansiin. Jos astia on liian kuuma koskettaaksesi, odota vähintään 10 minuuttia antaa potin jäähtyä.
Poista kansi ja aseta sivuun. Aseta kauha kattilaan.
Poista kansi yhdestä Petri-maljasta ja anna ravintoliemi täyttää astia puoliväliin. Peitä astia heti kansiineen.
Toista vaihe 14 jokaiselle petrimaljalle.
Ravintoliemien annetaan jähmettyä Petri-maljoissa vähintään tunnin ajan häiriöttömästi.
Ravista petrimaljoja varovasti sivuttain toisiinsa varmistaaksesi, että ravintolieme on täysin kiinteytynyt. Jos liemi ei ole täysin geeliytynyttä, odota vielä 20 minuuttia ennen tarkistamista uudelleen.
Peitä pöytä tai litteä pinta paperipyyhkeiden rullalla steriilin työalueen luomiseksi. Revitä paperipyyhe ja taita se neljä kertaa, jotta muodostuu paksu, suorakaiteen muotoinen vanu. Aseta tämä vanne työalueen toiseen päähän.
Siirrä yksi petrimalja steriilille työalueelle ja poista kansi. Käännä astia varovasti ympäri ja aseta toinen pää taitetun vanteen sivulle niin, että se on ylösalaisin ja hieman vinossa (pienellä raolla paperipyyhevanun vieressä).
Käännä kansi ympäri ja aseta se petrimaljan yläpuolelle steriilille työpinnalle. Jos kansiin tulee vesipisaroita, ravista kosteutta varovasti ennen kuin asetat peitetylle pinnalle, mutta älä koske kannen sisäpintaan.
Toista vaiheet 19 ja 20 jokaiselle petrimaljalle asettamalla käännetyn astian toinen puoli edellisen astian puolelle paperipyyhevanan sijaan. Astiat näkyvät porrastetut sarjat, joiden toisella puolella on aukkoja, jotta ylimääräinen kosteus voi haihtua.
Katso käännettyjä Petri-maljoja tarkistaaksesi, onko levyjen sivuilla oleva kosteus haihtunut. Kun kaikki kosteus on poistunut, käännä levyt oikealta ylöspäin ja peitä heti kansiilla käyttöä varten.
Inokuloidaan ravinne-agar maljalle pyyhkimällä haluttua viljelmää sisältävä tamponi ravinto-agar-pinnalle ennen peittämistä kannella. Käännä petrimalja niin, että kiinteä aine on päällä. Säilytä ympätty Petri-malja, jossa kiinteä aine on päällä viljelyä varten, ja kansi pohjassa, jotta se tarttuu kosteuteen, irtonaisiin hiukkasiin tai kasvuun.