Viisi vaihetta agarsivasteiden valmistamiseksi

Posted on
Kirjoittaja: Louise Ward
Luomispäivä: 8 Helmikuu 2021
Päivityspäivä: 19 Marraskuu 2024
Anonim
Viisi vaihetta agarsivasteiden valmistamiseksi - Tiede
Viisi vaihetta agarsivasteiden valmistamiseksi - Tiede

Agar on hyytelömäinen aine, joka on johdettu punalevien puhdistetuista soluseinistä.Sitä lisätään mikrobiologisiin väliaineisiin, jotka ovat materiaaleja, joilla mikro-organismeja kasvatetaan laboratorioissa, jotta aineelle saadaan enemmän kiinteää rakennetta. Agarilla ei ole ravintoarvoa, joten kun tutkijat käyttävät sitä mikro-organismien viljelyyn, he lisäävät erilaisia ​​ravintoaineita lisäämään bakteerien kasvua petrimaljoissa tai koeputkissa. Kun tutkijat varastoivat bakteereja koeputkeen, sitä kutsutaan agar-vinoksi, koska nestemäinen kasvualusta jähmettyy putken ollessa kallistettuna. Kääntyvä kannen yläosa estää agarin kuivumisen.


    Elatusaine valmistetaan kaltevuuteen eri tavalla kuin petrimaljoihin. Sterilointi tehdään putkeissa olevalla agarilla; petrimaljat esisteriloidaan ennen steriloitua agaria kaadetaan niihin. Mittaa tarvittava vesimäärä ja laita se Erlenmeyer-pulloon. Kuumenna sitä liesi, kunnes se on lähes kiehuva. Lisää tarvittaessa muita aineosia ja sekoita seosta hitaasti ja jatkuvasti, kunnes ne liukenevat. Nämä aineosat voivat sisältää naudanlihauutetta, peptonia ja pH-puskureita viljeltävän mikro-organismin tyypistä riippuen.

    Ennen dehydratoidun agarjauheen lisäämistä sekoita se pienellä määrällä kylmää tislattua vettä, jotta se ei tartu. Ole varovainen, kun lisäät agaria kuumaan nesteeseen, koska se voi vaahtoa ja ylittää astian. Lisää pieniä määriä agaria kerrallaan ja sekoita, jotta agari jakautuisi tasaisesti. Sammuta lämpö, ​​kun seos alkaa höyrystyä, ennen kuin se kiehuu.


    Aseta lukitsemattomat koeputket koeputitelineeseen. Täytä koeputket siirtämällä potista noin 5 millilitraa - noin 0,17 unssia tai 1 tl - sulaa agaria steriilillä pipetillä. Sulje kumpikin koeputki löysästi, koska agaria ei steriloida, jos se suljetaan tiukasti. Steriloi kaikki putket autoklaavissa noin 25 minuutin ajan 121 asteessa tai 250 asteessa Fahrenheit.

    Kun agar on vielä kuuma, kallista varovasti koeputkia pitävää telinettä kiinteälle pinnalle tai paksulle kirjalle varmistaen, että putkien välinen väliaine on vinossa suhteessa koeputkiin. Annetaan väliaineen jäähtyä ja kiinteytyä tässä kulmassa, mikä lisää agarin pinta-alaa. Kiristä koeputkien korkit, kun agar on jäähtynyt. Viistot ovat käyttövalmiita, kun agar on jähmettynyt. Niitä voidaan säilyttää huoneenlämmössä tai jääkaapissa tulevaa käyttöä varten.


    Inokuloidaan vino siirtämällä solut siirrostetulla silmukalla levyllä olevasta yhden pesäkkeen mikro-organismista viistojen pintaan. Siirrä silmukka vinossa pinnassa ja sulje putket takaisin. Inkuboi vinoa, kunnes on merkkejä kasvusta, ja aseta sitten putki jääkaappiin.