Sisältö
- HPLC ja vastaavat tekniikat
- Nopeus, tehokkuus ja tarkkuus
- Kustannukset ja monimutkaisuus
- Herkkyys ja resoluutio
HPLC tarjoaa nopean, automatisoidun ja erittäin tarkan menetelmän näytteen tiettyjen kemiallisten komponenttien tunnistamiseksi, mutta se voi olla kallis, monimutkainen ja ei toimi kaikille näytteille. Lääketieteellisissä, oikeuslääketieteellisissä, ympäristö- ja valmistuslaboratorioissa käytetään tekniikkaa näytteen kemikaalien kvantitointiin ja erottamiseen. HPLC: llä on sekä etuja että haittoja verrattuna muihin tekniikoihin.
HPLC ja vastaavat tekniikat
Kuten muutkin kromatografiamuodot, HPLC sallii kemiallisten ainesosien erottamisen liikkuvaa ja kiinteää faasia käyttämällä. Liikkuva faasi on nestemäinen ja paikallaan oleva faasi on kiinteä. Koska eri komponentit liikkuvat eri nopeuksilla, ne erottuvat toisistaan. Vaihtoehtoisiin tekniikoihin kuuluvat kapillaarielektroforeesi, jossa aineet kulkeutuvat sähkökentän liuosten läpi, ja muut kromatografiset menetelmät, kuten kiinteän faasin uutto, kaasukromatografia ja ohutkerroskromatografia.
Nopeus, tehokkuus ja tarkkuus
Verrattuna muihin kromatografiatekniikoihin, kuten TLC, HPLC on erittäin nopea ja tehokas. Se käyttää pumppua painovoiman sijasta nestemäisen liuottimen pakottamiseksi kiinteän adsorbenttimateriaalin läpi, jolloin eri kemialliset komponentit erottuvat liikkuessaan eri nopeuksilla. Prosessi voidaan saada päätökseen noin 10 - 30 minuutissa, ja se tarjoaa korkean resoluution. Se on tarkka ja erittäin toistettava. Koska se on suurelta osin automatisoitu, perus-HPLC-ajot voidaan suorittaa pienellä harjoituksella.
Kustannukset ja monimutkaisuus
Hyödyistä huolimatta HPLC voi olla kallista, edellyttäen suuria määriä kalliita orgaanisia aineita. Tekniikat, kuten kiinteän faasin uuttaminen ja kapillaarielektroforeesi, voivat olla halvempia ja jopa nopeampia, etenkin hyvän valmistuskäytännön mukaisissa analyyseissä. Vaikka olemassa olevien HPLC-menetelmien käyttäminen on suhteellisen helppoa, ongelmien vianmääritys tai uusien menetelmien kehittäminen voi olla monimutkaista. Tämä johtuu suurelta osin erilaisista moduuleista, sarakkeista ja liikkuvista vaiheista.
Herkkyys ja resoluutio
Yleisesti ottaen HPLC on monipuolinen ja erittäin tarkka kemiallisten komponenttien tunnistamiseksi ja kvantifioimiseksi. Monissa vaiheissa HPLC: n tarkkuus on pitkälti automatisoidun prosessin mukainen ja siksi erittäin toistettava. HPLC: llä on alhainen herkkyys tietyille yhdisteille, ja joitain ei voida havaita, koska ne adsorboituvat peruuttamattomasti. Haihtuvat aineet erotetaan paremmin kaasukromatografialla.