Sisältö
HPLC (korkearesoluutioinen nestekromatografia) ja GC (kaasukromatografia) ovat molemmat menetelmät, joita tutkijat käyttävät näytteiden analysoimiseen määrittääkseen, mitä näyte sisältää tai näytteessä olevien molekyylipitoisuuksien. Molemmat käyttävät samaa periaatetta, että raskaammat molekyylit eluoituvat tai virtaavat hitaammin kuin kevyemmät (polaarisuudella on myös merkitys eluointiajassa). Vaikka idea on sama, GC: llä ja HPLC: llä on useita eroja.
Mobiili vaihe
Kromatografialaitteiden liikkuva faasi on aine, joka liikuttaa näytettä koneen läpi. HPLC: ssä liikkuva faasi on neste, joka koostuu orgaanisesta liuottimesta, ultrapuhtaasta vedestä ja muista aineosista sen yhteensopivuuden varmistamiseksi näytteen kanssa. GC käyttää kaasua liikkuvassa vaiheessaan. Käytettyihin kaasuihin sisältyy helium, typpi, argon tai vety analysoitavasta riippuen.
Sarakkeet
Kun näytteet kulkevat kromatografiakolonnien yli, näyte ja liikkuva faasi ovat vuorovaikutuksessa kolonnin sisällön kanssa aiheuttaen näytteen komponenttien eluoitumisen eri aikaan. HPLC-pylväät ovat tyypillisesti neljästä kuuteen tuumaa pitkä metalli- tai lasiputki, joka on tiiviisti pakattu piidioksidilla tai erilaisilla hiiliketjun pituuksilla. GC-järjestelmissä on kelatut kapillaaripylväät, joiden sisäseinät on päällystetty erilaisilla materiaaleilla laboratorion tarpeiden mukaan. Venytettyinä GC-pylväiden pituus voi olla 100 jalkaa.
Näytteet
GC: tä käytetään haihtuville yhdisteille (sellaisille, jotka hajoavat nopeasti), kun taas HPLC on parempi vähemmän haihtuville näytteille. Jos näyte sisältää suoloja tai siinä on varaus, se on analysoitava HPLC: llä, ei GC: llä.
Lämpötilan säätö
GC-pylväät ovat koneen uunissa. Tietokone muuttaa lämpötilaa näytteiden analysoinnin aikana. Mitä korkeampi lämpötila, sitä nopeammin näyte eluoituu, mutta liian korkeat lämpötilat tuottavat huonot tulokset. HPLC-pylväät pidetään jatkuvasti vakaassa lämpötilassa (useimmiten huoneenlämpötila).