Sisältö
- Parempi visualisointi
- Tunnistaminen ja luokittelu
- Elinkelpoisuuden havaitseminen
- Solurakenteiden tunnistaminen
Mikrobiologit tutkivat mikroskoopin avulla mikro-organismien, kuten levien, alkueläinten, bakteerien, sienten ja virusten, ominaisuuksia. Vaikka joitain organismeja, kuten alkueläimiä ja hiivasoluja, on helppo tarkkailla märällä kiinnityksellä, bakteerisolut vaativat värjäyksen. Tutkijat kehittivät useita menetelmiä, kuten grampivärjäystä, happamaton värjäys ja fluoresoiva värjäys bakteerisolujen ja solurakenteiden parempaan visualisointiin. Tällaisia värjäysmenetelmiä käyttämällä on mahdollista tunnistaa rakenteelliset piirteet, jotka auttavat luokittelemaan bakteerit.
Parempi visualisointi
Bakteeriorganismit ovat niin pieniä, että suurin osa niistä on näkyvissä vain mikroskoopilla, suurennusvoima 1000X. Pelkkä koon suurennus ei kuitenkaan anna riittävää selkeyttä, joten bakteerit on siksi värjättävä ennen havainnointia visualisointiin tarvittavan selvyyden aikaansaamiseksi.
Tunnistaminen ja luokittelu
Bakteerien värjäys bakteerityyppien erottamiseksi tunnetaan differentiaalisena värjäyksenä. Gram-tahra on yksi sellainen differentiaalinen tahra, joka erottaa bakteerit niiden soluseinämäpitoisuuden perusteella. Tässä menetelmässä bakteerisolut reagoivat kiteviolettisäiliön kanssa saadakseen violetin värin. Kun väriainetta lisätään, jotkut bakteerisolut menettävät värin, kun taas toiset eivät. Kun lisätään safraniinivärjäystä, värjäytyneet solut vievät värjäytymisen punaiseksi, kun taas bakteerisolut, jotka eivät menettäneet väriä, pysyvät violettiina. Punaisen värin omaavia bakteerisoluja kutsutaan gram-negatiivisiksi organismeiksi ja niitä, jotka eivät ota väriä, luokitellaan gram-positiivisiksi organismeiksi. Gram -värjäys tarjoaa nopean menetelmän infektioihin osallistuvien bakteerien alkuperäiseksi tunnistamiseksi. Samoin haponkestävä värjäysmenetelmä auttaa spesifisesti tunnistamaan organismit, jotka kuuluvat Mycobacteria-bakteeriluokkaan, kuten Mycobacterium tuberculosis.
Elinkelpoisuuden havaitseminen
Bakteeriviljelynäytteissä on usein tärkeää havaita elävien bakteerisolujen läsnäolo. Värjäysmenetelmät, kuten fluoresoiva värjäys, auttavat tunnistamaan, ovatko viljelysolut elinkykyisiä. Elävillä bakteereilla on kyky muuttaa 5-syaani-2,3-ditolyylitetratsoliumkloridi (CTC) -värjä väriaineeksi, joka osoittaa punaista fluoresenssia. Siksi, kun CTC: llä värjätyt viljelmät emittoivat tällaista fluoresenssia, se osoittaa elinkykyisten bakteerien läsnäolon. Propidiumjodidi on tahra, joka vaikuttaa vain elottomiin soluihin, joissa on vaurioituneet kalvot, ja siksi siitä on hyötyä kuolleiden bakteerisolujen tunnistamisessa.
Solurakenteiden tunnistaminen
Värjäys tarjoaa menetelmän useiden solurakenteiden selkeäksi visualisoimiseksi. Esimerkiksi Fuelgen-värjäysmenetelmä mahdollistaa ytimen tunnistamisen bakteerisoluissa, kun taas Alberen värjäys on hyödyllinen metokromaattisten rakeiden visualisoinnissa. Samoin hopean kyllästysmenetelmä mahdollistaa spiroskeettien tunnistamisen. Flagellaa on helppo havaita, kun se värjätään Ryun värjäyksellä. Malakiittivihreävärjäys auttaa tunnistamaan bakteerien itiöt.